Le clonage moléculaire

Le clonage moléculaire est une technique centrale en biologie moderne, permettant d’isoler, de manipuler et d’amplifier des séquences d’ADN spécifiques. Que ce soit pour étudier la fonction d’un gène, produire des protéines recombinantes ou développer des outils thérapeutiques, cette approche a révolutionné la recherche fondamentale, la médecine et les biotechnologies.

Ce document vous guidera à travers les principes, les méthodes et les outils essentiels du clonage moléculaire. Vous découvrirez comment extraire et purifier l’ADN, choisir les stratégies expérimentales adaptées et maîtriser les techniques classiques et modernes de clonage. Vous apprendrez aussi à transformer des cellules hôtes, à sélectionner et valider les clones obtenus, et enfin, à exprimer les protéines recombinantes.

À l’issue de ce cours, vous serez capable de concevoir et réaliser un protocole de clonage, en comprenant chaque étape et les outils associés.

 

SOMMAIRE

INTRODUCTION

LES OUTILS DU CLONAGE D'ADN

METHODOLOGIE EXPÉRIMENTALE

​​ANNEXES

  • Technique de base de biologie moléculaire

    • PCR
    • Electrophorèse sur gel d'agarose
    • Marquage des sondes
    • Hybridation des acides nucléiques

  • Rappels sur l'ADN

    • Rôle biologique de l'ADN
    • Structure chimique de l'ADN
    • Propriétés physico-chimiques de l'ADN
    • Stabilité et dénaturation de l'ADN